背景介绍
     流感病毒传播迅速，每年可引起季节性流行，儿童、孕妇、老人以及慢性基础疾病患者等高危人群，患流感后出现严重疾病，已成为全球性的公共卫生安全问题，而接种流感疫苗可预防流感病毒及其并发症。流感病毒感染动物模型的临床病理特征及进展程度应与人相似，雪貂为首选动物（EMA）。小鼠通常被认为非疫苗保护研究优选动物，但由于BALB/c小鼠对流感病毒敏感，有明显的症状和体征，近年大部分流行毒株如H1N1、B/Victoria、B/Yamagata均可导致出现小鼠体重下降、肺病毒载量上升、轻到中度间质性肺炎等感染特征，且BALB/c小鼠的生长周期短，遗传背景明确，便于操作，常用于流感疫苗的效价评估。本研究通过建立BALB/c小鼠B/Austria/1359417/2021(B/Victoria Lineage) 病毒感染模型，可引起中度及以上间质性肺炎和一定程度的病毒载量升高，为后续流感疫苗评价提供依据。图1 常见的流感病毒类型评价案例分析 1. 实验动物
SPF级BALB/c小鼠12只，雌雄各半，6周龄，体质量18~24g；B/Austria/1359417/2021(B/Victoria Lineage) 病毒来源于NIBSC。 2. 主要仪器
主要仪器：电子天平，显微镜 3. 方法简述
*取适应性观察合格的BALB/c小鼠12只，雌雄各半，随机分为两组，即第一批处理动物为A组，第二批处理动物为B组。
*对每只小鼠使用异氟烷进行麻醉，随后取B/Austria/1359417/2021(B/Victoria Lineage) 病毒5倍稀释液，通过滴鼻使小鼠感染0.05mL病毒株。
*小鼠在感染病毒后第5天处理6例动物（即A组），动物安乐死后取肺组织，左肺提取RNA用q-PCR法测定病毒载量，右肺HE染色进行组织病理学检查；*在感染病毒后第7天，处理6例动物（即B组），动物安乐死后取肺组织器官，左肺提取RNA用q-PCR法测定病毒载量，右肺HE染色进行组织病理学检查。每天观察动物状态，记录其死亡数，并且对死亡动物进行解剖，观察肺病变，确定其因流感致肺感染而死亡者方可计数。临床观察期间每天称重1次。
4. 实验结果
1. 小鼠的生存情况
实验期间大部分造模动物于造模后第1天开始出现被毛蓬乱等现象，第5天开始出现被毛蓬乱、弓背等症状。各造模动物体重于造模后第4天出现明显下降，至第7天体重持续下降（见图5—图6）。 2. 小鼠肺部病毒载量
造模后第5天造模动物肺部病毒载量达到峰值，至第7天造模动物肺部病毒载量略微下降，但病毒载量仍处于高水平（见图7）。 3. 组织病理学改变
BALB/c小鼠滴鼻感染B/Austria/1359417/2021 (B/Victoria Lineage) 病毒5至7天，均会引起肺脏不同程度的病变，具体表现为细支气管黏膜上皮细胞变性/坏死、脱落；肺泡/肺泡腔可见浆液/纤维渗出；肺泡腔/血管周围炎细胞浸润等（见图8—图11）。
5.实验结论
     本研究建立的B/Austria/1359417/2021(B/Victoria Lineage) 病毒鼻滴感染BALB/c小鼠模型，在滴鼻感染B/Austria/1359417/2021(B/Victoria Lineage) 后，第4天体重出现明显下降，至第7天体重持续下降；第5天病毒载量达到峰值，第7天动物肺脏病变程度最高。本研究成功建立了小鼠临床流感病毒感染模型，为后续疫苗的研发提供了良好的动物模型。